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棘盘瑞氏绦虫PCR检测试剂盒厂家

棘盘瑞氏绦虫PCR检测试剂盒厂家

产品简介:棘盘瑞氏绦虫PCR检测试剂盒厂家
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HIV检测试剂盒 样品类型:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆

产品型号:50T

浏览次数:27

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 棘盘瑞氏绦虫PCR检测试剂盒厂家

 英文名称

 Raillietina echinobothridaPCR

 货号

 LZP7214

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
Arsenazo I二氯化铂 Pt basis ≥73%反,反-2,4-庚二烯 90%

Arsenazo III钯碳酸钙 钯含量, 5.0%三硫酮 ≥99%, FG

Barium carbonate醋酸钯 99.9% metals basis4-羟基-3-甲氧基苯甲 98%

Barium chromate醋酸钯 99.98% metals basis六氯酮 99%

Barium stearate三氯化铑,合 Rh 38.5-42.5% 2-异基-4-甲基噻唑 98%

Barium hydroxide octahydrate三氯化钌 合物 38.0-42.0% Ru basis3-甲基-1-丁硫 97%

Silicon powder铑粉 99.95% metals basis甜瓜 80%

Silicon铑碳催化剂 铑含量 (wt%) ,5%2-甲基庚酸  98%

Silicon moxide钌碳 Ru 5%香草酸甲酯 99%

Silicon carbide氧化钌 99.9% metals basis4-甲硫基-4-甲基-2-戊酮 99%

Silicon dioxide氧化钌(IV) 合物  钌含量75%4-甲基-4-巯基-2-戊酮 98%

Silicone氯亚铂酸钠 Pt 44.5%3-甲硫基-1-己 99%

Silicone碳酸银 AR,99.0%3-巯基-1-己 98%

Silicone氯金酸钠 金含量,48% 3-甲基-2--1-硫 98%

Silicone磷酸银 银含量, 77.0 % 2-甲基-3-呋喃硫 95%

Silicone二氯四氨钯 Pd ≥43.0%2-甲基四-3-硫 97%

柚皮苷二氢查尔酮CAMLG (D5L9J) Rabbit mAbProtamine 2  鱼精蛋白2抗体

潮霉素B(罗氏原装)eRF1 AntibodyProstatic Acid Phosphatase  前列腺酸性磷酸酶抗体

芹菜苷; 芹黄苷CD45 (D9M8I) XP® Rabbit mAbProstaglandin E Receptor EP2  前列腺素E2受体2抗体

-7-O-葡萄糖苷CD45 (D9M8I) XP® Rabbit mAbProSAPiP1   含脯氨酸突触相关蛋白相互作用蛋白1抗体

-4’-O-葡萄糖苷;酚-4’-O-β-D-葡萄糖苷Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAbProperdin  P因子/备解素抗体

柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野决明苷PSMC3/TBP1 AntibodyProminin 2  造血干细胞抗原CD133相关蛋白抗体

山柰酚-3-O-芸香糖苷(标准品)ATR (E1S3S) Rabbit mAbPROK2/Prokineticin 2  前动力蛋白2抗体

泮托拉唑钠一物Phospho-BMAL1 (Ser42) AntibodyPROK1/PRK1/EG-VEGF  内分泌腺衍生血管内皮生长因子抗体

泮托拉唑钠(标准品)Symmetric Di-Methyl Histone H3 (Arg8) (E1W5H) Rabbit mAbProhibitin  抑制素/肿瘤抑制因子抗体

靛玉红Acetyl-Histone H4 (Lys12) (D2W6O) Rabbit mAbProfilin 2  前纤维蛋白2抗体
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