蛙病毒PCR检测试剂盒价格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
Tantalum(V) oxide二硫苏糖 99%2-基硫 96%

Dysprosium(III)oxide二硫苏糖 用于分子生物学, ≥99%乙酸硫噻唑 99%

Erbium(III)oxide二硫苏糖 用于电泳, ≥99%2-(*基硅)苯基三氟磺酸盐 97%

Europium(III)oxide1,8-二氮-9-芴酮 99%茶螺烷 technical, ≥90% (GC,mixture of isomers)

Gadolinium(III)oxideN,N'-二环己基-4-吗啉脒 98%二噻吩二硫 97%

Lanthanum oxideDNA酶 ≥300 Kunitz units/mg protein季酮酸 96%

Neodymium trifluoride3,3'-二氨基联苯胺 99%乙酸香兰素酯 98%

Neodymium oxide3,3'-二氨基联苯胺 97%异丁酸香兰素酯 ≥98%, FG

Praseodymium(III) oxide2,7-二溴芴酮 96%香兰基丁 96%

Samarium oxide2,6-二氯酚靛钠盐 AR香草酸 98%

Scandium oxide3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠 99%反式-1,2-环己二胺 98%

Thulium oxide 3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐合物 98%1，2-环己二胺 99%

Yttrium oxideN-乙基顺二酰亚胺 99%反式-1，2-环己二胺四乙酸,一 99%

Bees wax,whiteN-乙基顺二酰亚胺 超纯级，99.5%卡铂 98%

Ceresin乙二双（2-氨基乙基）四乙酸 AR反式-1.2-环己二胺四乙酸 98%

Paraffin with ceresin乙二胺四乙酸三盐 98%顺铂 Pt, 65%

甘草素（消旋）PC2 (D1E1S) XP® Rabbit mAbPRKAG2/AMPKγ2  腺苷单磷酸活化蛋白激酶γ2抗体

芹糖甘草苷；甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷Miro2 AntibodyPRKAA2/AMPK alpha 2  腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体

芹糖异甘草苷；异甘草苷芹糖Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Magnetic Bead Conjugate)presenilin 2/PS-2  早老素蛋白-2抗体

白屈菜红碱(标准品）BMAL1 (D2L7G) Rabbit mAbpresenilin 1/PS-1 (NT)  早老素蛋白-1抗体

TAE684LEF1 (C12A5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)presenilin 1/PS-1 (CT)  早老素蛋白-1抗体

青蒿酸(标准品)SimpleChIP® Human HSP70 Intron 1 Primerspresenilin 1/PS-1  早老素蛋白-1抗体

防己诺林碱PRNP (D3Q5C) Rabbit mAbPregnancy zone protein  区带蛋白PZP抗体

澳茄新碱Phospho-GSK-3β (Ser9) (D85E12) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)PRDX5/PRDX6  过氧化还原酶5/6抗体

五合硫酸金雀花碱/硫酸鹰爪豆碱(标准品)IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)PRDX3/peroxiredoxin 3  过氧化还原酶3抗体

五合硫酸金雀花碱/硫酸鹰爪豆碱P-Cadherin (12H6) Mouse mAbPRDX2/Peroxiredoxin-SO3  硫氧还蛋白过氧化物酶2
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