产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > PCR试剂盒 > PCR检测试剂盒 > 50T牙龈卟啉单胞菌PCR检测试剂盒厂家
牙龈卟啉单胞菌PCR检测试剂盒厂家

牙龈卟啉单胞菌PCR检测试剂盒厂家

产品简介:牙龈卟啉单胞菌PCR检测试剂盒厂家
上海联祖生物相关产品:
DBP检测试剂盒免费为您提供全程技术指导,解决您的后顾之忧

产品型号:50T

浏览次数:43

更新时间:2021-03-13

产品厂地:上海市

详情介绍
品牌其他品牌

注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 牙龈卟啉单胞菌PCR检测试剂盒厂家

 英文名称

 Porphyromonas gingivalis PCR

 货号

 LZP7178

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
DPG甲氧甲酰基亚甲基三苯基膦 98%氢二钠 AR()

Guanidine carbonate甲氧甲酰基三苯基溴化膦 98%三乙酯 99%

Isophorone甲基三辛基氯化铵 97%氟化,无 电子级,粉末

Rotene甲基三苯基溴化鏻 98%1,1,1,2-四氟乙烷 99.95%

Corticosterone(甲氧基)三苯基氯化磷 98%三 AR,99.0%

MBTH Hydrochloride基三苯基溴化膦 99%甲基烯酸三氟乙酯 包含 100 ppm MEHQ 稳定剂,98%

PVPP四甲基化铵 98%2,2,2-三氟乙 99.5%

1,3-Dihydroxyacetone dimmer四丁基氟化铵,三 90%大黄素 ≥90% (HPLC)

4-Amiantipyrine苯基*基溴化铵 98%石杉碱甲 分析标准品

Cyclohexane四基氯化铵 97%石杉碱甲 99%

Acetophene甲基三乙基氯化铵 98%和厚朴酚 分析标准品

3'-Amiacetophene甲基三丁基氯化铵 75 wt. % in H2O杨梅素 97%

Benzanthrone四苯基溴化膦 98%杨梅素 分析标准品,≥98%

Benzylacetone四乙基氢氧化铵 AR,25%溶液厚朴酚  ≥98% (HPLC)

Bis-pyrazolone四基化铵 98%杨梅苷 98%

Cyclooctane四基氢氧化铵 1.0 M in H2O葛根素 分析标准品,≥98%

苏丹Ⅲ/苏丹红III/溶剂红23Phospho-FoxO3a (Ser253) (D18H8) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/APC  APC标记的兔抗豚鼠IgM

苏丹Ⅳ/苏丹红4/溶剂红24MT1-MMP (D1E4) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/AP  碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗豚鼠IgM

油红O/溶剂红27/苏丹红5BMMP-2 (D8N9Y) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗豚鼠IgM

苏丹红G/溶剂红1/油红113TRF2 (D1Y5D) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗豚鼠IgM

苏丹/溶剂黑3SignalSilence® IRF-7 siRNA IRabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗豚鼠IgM

苏丹红BLAMTOR4/C7orf59 (D4P6O) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗豚鼠IgM

苏丹红7B/溶剂红19/脂肪红7BSOD2 (D3X8F) XP® Rabbit mAbRabbit anti-Guinea pig IgM whole serum  兔抗豚鼠IgM抗血清

苏丹蓝II/溶剂蓝35SOD2 (D3X8F) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM  兔抗豚鼠IgM

吖啶橙/碱性橙14Neurogenin 2 (D2R3D) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgG/RBITC  罗丹明标记的兔抗豚鼠IgG

甲基红Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗豚鼠IgG
牙龈卟啉单胞菌PCR检测试剂盒厂家人脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:RT10克

人脱氧尿三磷酸(DUTP)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:RT1米

人唾液酸(SA)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:100毫升

人晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:RT100克

人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:10克

人晚期氧化蛋白产物(AOPP)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:25毫升

人网膜素(omentin)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:2~8℃25毫升

人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:10S/盒
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 



留言询价

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

上海联祖生物科技有限公司 公司地址:上海松江区莘砖公路518号5号楼601室   技术支持:环保在线
  • 电话:021-61210612
  • QQ:3191886983
  • 手机:13482402338 微信同号
  • 邮箱:3191886983@sdkjfhkjsdhfqq.com

扫一扫 更多精彩

微信二维码

联系我们

contact us

扫一扫,关注我们

返回顶部