猪环曲病毒PCR检测试剂盒规格

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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
STPP2,7-二羟基萘 97%2,5-二氯苯 97%

Sodium metasilicate nahydrate7-甲氧基-2-萘满酮 98%2-基苯酚 95%

Sodium stannate二(2-乙基己基)磷酸酯 95%1-甲基-3-硝基胍 98%(~25%water)

Sodium tungstate dihydrate二(2-乙基己基)磷酸酯 CP甲氨基乙缩二甲 97%

1-Naphthyl phsophoric acid sodium salt二(2-乙基己基)磷酸酯 95%3-氨基噻吩－2－羧酸甲酯 99%

2-Naphthyl phosphate sodium salt对苯醌 97%2-三氟甲酰氯 98%

Sodium bitartrate mohydrate对苯醌 99%邻三氟甲酸 98%

Sodium formate对苯醌 用于光谱测定胺, ≥99.5% (HPLC)2-(三氟甲基)苯甲 98%

Sodium dodecaate盐酸苯肼 99%2,4,6-三氯苯甲 97%

Sodium oleate苯肼 AR,98.0%帕莫酸 97%

Sodium stearate硫酸苯肼 CP,98.0%3-双(2-羟乙基)氨基-2-羟基磺酸 98%

PAAS马来酰肼 98%5,5'二硫代双(2-甲酸) 98%

Sodium azide甲基三辛基氯化铵(R=C8-C10)  90%N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基)-3-甲氧基苯胺钠盐 99%

ResorilN-丁基溴化吡啶 99%2-氯乙基磺酸钠 98%

2-Amiphel苄基三丁基氯化铵 98%N-三(羟甲基)甲氨基-2-羟基磺酸 99%

3-Amiphel1-丁基吡啶盐酸盐 98%N-(3-磺基)-3,3',5,5'-四甲基联苯胺钠盐 99%

精胺四盐酸盐;盐酸精胺WDR5 (D9E1I) Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗马IgG

D-荧光素盐，D-虫荧光素盐Tyrosine Hydroxylase (A8Y7R) Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗马IgG

盐酸雷尼替丁p63-α (D2K8X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgG

盐酸雷尼替丁(标准品)p63-α (D2K8X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗马IgG

荧光素钠PCNA (D3H8P) XP® Rabbit mAbRabbit anti-horse IgG whole serum  兔抗马IgG抗血清

D-虫荧光素钠盐;D-荧光素钠盐PCNA (D3H8P) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgG  兔抗马IgG

2ˊ,7ˊ-二氯荧光素钠盐Phospho-CDCP1 (Tyr707) AntibodyRabbit Anti-Guinea pig IgM/RBITC  罗丹明标记的兔抗豚鼠IgM

天青I;天青BCD71 (D7G9X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗豚鼠IgM

天青IICD71 (D7G9X) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗豚鼠IgM

天青AUVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAbRabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗豚鼠IgM
猪环曲病毒PCR检测试剂盒规格人套膜蛋白(iNV)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10克

人特异性巨噬细胞武装因子(SMAF)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃1克

人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：500克

人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：300支/包

人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10个

人铁蛋白(FE)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃25毫升

人铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT100克