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青霉通用PCR检测试剂盒厂家

产品简介

青霉通用PCR检测试剂盒厂家
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更新时间:2021-03-13
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 青霉通用PCR检测试剂盒厂家

 英文名称

 Penicillium spp.PCR

 货号

 LZP7130

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
Chlorosulphonphel S乙酸异戊酯 AR,99%4-(1-羟乙基)吡啶 98%

AgDDTC乙酸异戊酯 CP,98%4(5)-羟甲基咪唑盐酸盐 98%

Alizarin乙酸异戊酯 ≥99%, FCC, FG(R)-3-羟基吡咯烷盐酸盐 98%

Alizarin red甲酸异戊酯  mixture of isomers, ≥97%, FG4-苯甲酸甲酯 98%

Alizarin violet 3B异戊酯 97%2-苯甲酸甲酯 98%

Alizarin yellow GG乙酸芳樟酯 96%3--4吡啶 95%

Alizarin yellow R乙酰酸 AR,99.0%吲哚-2-羧酸 98%

Alizarin yellow R sodium salt叶 98%吲哚-3-羧酸 98%

Acid alizarin blue B芳樟 98%1-甲基环戊 99%

Alkali blue 6BDL-乳酸 ACS, ≥85%1-甲基-3-吲哚酸 97%

Alkali blue 6B sodium salt月桂酸 AR,98%5-甲基异噁唑-4-甲酸 98%

CPA-I丁酸甲酯 Standard for GC,>99.5% (GC)3,3-二甲基烯酸甲酯 98%

CPA-Ⅲ丁酸甲酯 99%3-甲基-4-甲酸 99%

CPA-Ⅳ丁酸甲酯 分析标准品,≥99.5% (GC),用于环境分析3-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)苯甲酸 97%

CPA-mA异丁 >99.0%(GC)4-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)苯甲酸 97%

CPA-mN异丁 CP,98%6-甲基吲哚 98%

庚酸雌二(标准品)SignalSilence® UCHL1 siRNA IIRASAL1  RAS蛋白样激活剂1抗体

炔雌(标准品)CARD9 AntibodyRASA3  Ras-GTP酶激活蛋白3抗体

炔雌CK1δ AntibodyRarres3/TIG3  视黄酸受体应答蛋白3抗体

乙硫异烟胺,硫异烟胺NLRC4 (D5Y8E) Rabbit mAbRARRES1/TIG1  视黄酸受体应答蛋白1抗体

乙硫异烟胺,硫异烟胺(标准品)IL-1β (D4T2D) Rabbit mAb (Mouse Specific)RAR α  维甲酸受体-α 抗体

依曲韦林Phospho-Smad1 (Ser463/465)/ Smad5 (Ser463/465)/ Smad9 (Ser465/467) (D5B10) Rabbit mAb (PE Conjugate)RAR gamma/Retiic Acid Receptor gamma  维甲酸受体γ抗体

法莫替丁Smad1 (D59D7) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)RAR Beta  维甲酸受体β抗体

法莫替丁(标准品)Phospho-Src (Ser17) (D7F2Q) Rabbit mAbRaptor  mTOR相关调控蛋白抗体

非布索坦Phospho-Bim (Ser77) (D4H12) Rabbit mAbRAP2B  原癌基因相关蛋白RAP2B抗体

非布索坦(标准品)Keratin 17/19 (D4G2) XP® Rabbit mAbRap2A  Rap2A抗体
青霉通用PCR检测试剂盒厂家人磷酸甘油酸变位酶2(PGAM2)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:40片/箱

人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光500毫克

人磷酸葡萄糖变位酶(PGM)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500克

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