欢迎进入上海联祖生物科技有限公司网站!
13482402338
产品中心

Product Center

当前位置:首页  -  产品中心  -  PCR试剂盒  -  PCR检测试剂盒  -  50T阿尼昂尼昂病毒PCR检测试剂盒说明书

阿尼昂尼昂病毒PCR检测试剂盒说明书

产品简介

阿尼昂尼昂病毒PCR检测试剂盒说明书
上海联祖生物相关产品:
PKA检测试剂盒分子生物学:核酸电泳、DNA Marker、克隆表达、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因组提取、质粒提取、RNA提取、DNA纯化回收、核酸纯化相关试剂。

更新时间:2021-03-13
访问次数:378
详细介绍在线留言


注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 阿尼昂尼昂病毒PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 O'nyongnyong Virus(ONNV)RTPCR

 货号

 LZP7083

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
Luciferase from Bacteria固蓝B 90%N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀酸亚胺基)脲六氟磷酸盐  98% 好

Luciferase firefly高铁试剂 98.5%三(N,N-四亚甲基)磷酰胺 98%

Maltose Phosphorylase固蓝BB盐 AR1-对甲苯磺酰基-3-硝基-1,2,4-三唑  98%

Microcococcus lysodeikticus cells4-氟-3-硝基三氟甲苯 99%1-对磺酰咪唑 99%

Mutarotase核黄素-5′-磷酸钠盐合物 73-79%(HPLC)O-(N-琥珀酰亚胺基)-N N N'N'-四甲基四氟酸脲  97%

Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus vem戊菊酯 分析标准品,2,4,6-三吡啶基三  99%

Phosphodiesterase II from bovine spleen甲脒盐酸盐 96%三(2-羧乙基)膦盐酸盐 98%

PLA2(+)-葑酮 standard for GC, ≥99.5% (GC)叠氮基*基硅烷 93%

PAO甲酸 for LC-MS, ~98% (T)O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟酸酯 98%

 Protease S Aureus固黑K盐 80%2,4,6-三异基苯磺酰氯 97%

UTI固红 3 GL Biological stainN,N,N′,N′-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐 99%

COMT固红RC 生化试剂级N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氢-4-氧代-1,2,3-苯并三-3-基)脲四

Irganic Pyrophosphatase固红TR半氯化锌盐 90%N,N,N',N'-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐 98%

Phosphorylase b from rabbit muscle固紫B盐 80%伍德沃德氏试剂K 98%

Thermolysin from Bacillus thermoproteolyticus rokkoN-甲酰-L-甲硫氨酰-L-白氨酰-L苯氨酸 97%魏因勒卜链接剂 98%

β-N-Acetylglucosaminidase(S)-(-)-2-甲酰胺琥珀酸酐 90%,工业级印刷标签,用于25G(ML)及以下包装,尺寸: 94mm*28mm

尼索地平Tyrosinase  酪氨酸酶(多肽抗原)SLC16A7/MCT2  单羧酸转运蛋白2抗体

尼索地平(标准品)OAT4L又称URAT1 (Urate Transporter 1)  尿酸盐重吸收转运子1 (抗原)SLC16A3/MCT4  单羧酸转运蛋白3/4抗体

布洛芬VAP1(vascular adhesion protein 1)  血管粘附蛋白1(多肽抗原)SLC14A1/RACH1  尿素转运型糖蛋白抗体

布洛芬(标准品)Vimentin  波形蛋白(抗原)SLC12A3/NCCT  钠氯离子转运蛋白抗体

马来酸依那普利VSIG4 (V-set and immuglobulin domain-containing protein 4)  VSIG4 T淋巴细胞负调节蛋白之一(抗原)SLAMF9/CD2F-10  CD2F-10抗体

马来酸依那普利(标准品)WNK4(Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with  lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4)  一种新的丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK4(多肽抗原)SLAMF9  CD2F-10抗体

氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle  锌指蛋白300(抗原)SLAMF7/CD319  SLAMF7抗体

氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶(标准品)ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a)  锌指脂蛋白-1a(抗原)SLAMF6  SLAMF6抗体

琥珀酸舒马曲普坦ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b)  锌指脂蛋白-1b(抗原)Skp2/skp2 p45  细胞S期激酶相关蛋白2抗体

琥珀酸舒马曲普坦(标准品)ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c)  人锌指脂蛋白-1c(抗原)SKP1  S期激酶相关蛋白1抗体
阿尼昂尼昂病毒PCR检测试剂盒说明书人横纹肌辅肌动蛋白α(smActinin-α)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:250克

人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人红细胞膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT支

人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人踝蛋白(talin)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

在线留言

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

TEL:021-61210612

扫码加微信