欢迎进入上海联祖生物科技有限公司网站!
13482402338
产品中心

Product Center

当前位置:首页  -  产品中心  -  PCR试剂盒  -  PCR检测试剂盒  -  50T犬血支原体PCR检测试剂盒厂家

犬血支原体PCR检测试剂盒厂家

产品简介

犬血支原体PCR检测试剂盒厂家
上海联祖生物相关产品:
ICD检测试剂盒柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好

更新时间:2021-03-13
访问次数:364
详细介绍在线留言

注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 犬血支原体PCR检测试剂盒厂家

 英文名称

 Mycoplasma haemocanisPCR

 货号

 LZP7030

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
NCTC clone 929(小鼠成纤维)说明书Anti-LRRTM2研究领域  免疫学 神经生物学 内分泌病

人心脏微血管内皮细胞*培养基现货供应Anti-LRRTM4研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 染色质和核信号 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 b-淋巴细胞

豚鼠白介素2(IL-2)elisa试剂盒Anti-LZIC研究领域  细胞生物 信号转导

大鼠骨髓来源内皮祖细胞价格Anti-LGI3研究领域  细胞生物 细胞凋亡

DMEM/F12(不含HEPES,含双抗)说明书Anti-Lhx4研究领域  细胞生物 信号转导 细胞凋亡

小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa试剂盒Anti-LCA/Lens culinaris agglutinin研究领域  肿瘤 免疫学

大鼠角膜成纤维细胞报价Anti-LHX6研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 细胞凋亡 线粒体

人肠微血管内皮细胞*培养基价格Anti-LRRC2研究领域  细胞生物 信号转导 淋巴细胞 t-淋巴细胞 b-淋巴细胞 表观遗传学

果胶酶实验步骤Anti-LRRC59研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学

有机磷残留试剂盒Anti-LRRC41研究领域  细胞生物 免疫学 染色质和核信号 表观遗传学

猪前列腺素E2Elisa Kit说明书Anti-C17orf82研究领域  神经生物学 信号转导

小鼠胎盘泌乳素(PL)elisa试剂盒Anti-LRP15研究领域  肿瘤 心血管 信号转导 脂蛋白 新陈代谢

人肝细胞生长因子(HGF)elisa试剂盒Anti-LACE1研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 神经生物学 信号转导 转录调节因子 肿瘤细胞生物标志物

牡荆素3681-93-4 实验方法Anti-Elastin研究领域  肿瘤 免疫学 干细胞 细胞类型标志物 肿瘤细胞生物标志物

转基因植物Sad1基因PCR检测试剂盒免费代测Anti-LRRC4B/NGL3研究领域  肿瘤 免疫学 转录调节因子 细胞粘附分子

川续断皂苷VI;木通皂苷DIntegrin alpha 1  整合素α1抗原Transferrin receptor  转铁蛋白受体抗体

芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷;大波斯菊苷Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7)  整合素α4β7抗原Transferrin  转铁蛋白抗体

辽东楤木皂苷VIntegrin AlphaE2/CD103  整合素αE2抗原Transcription factor 25/Nulp1  核转录因子25抗体

辽东楤木皂苷XENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3)  ENPP3抗原Transaldolase 1  转酶抗体

辽东楤木皂苷VIIIQGAP1  支架蛋白抗原TRAK1  驱动蛋白结合蛋白1抗体

阿魏酸乙酯IRF-1(Interferon regulatory factor-1)  干扰素调节因子抗原TRAILR2/DR5/CD262  肿瘤细胞调亡素/死亡受体5抗体

IRAK 2  白介素-1受体相关激酶2TRAILR1/DR4/APO2  死亡受体4抗体

茶碱IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide  白介素-1受体拮抗剂抗原TRAIL  肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抗体

D十-无葡萄糖Integrin a7(integrin alpha 7)  整合素α7抗原TRAF7  肿瘤坏死因子受体相关因子7抗体

脱穿心莲内酯integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29)  粘附分子整合素β1抗原TRAF6  肿瘤坏死因子受体相关因子6抗体
犬血支原体PCR检测试剂盒厂家T细胞特异性鸟苷三磷酸酶(Tgtp)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25克

α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500支/包

α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃5克

α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT支

α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:1克*5
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 

在线留言

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

TEL:021-61210612

扫码加微信