欢迎进入上海联祖生物科技有限公司网站!
13482402338
产品中心

Product Center

当前位置:首页  -  产品中心  -  PCR试剂盒  -  PCR检测试剂盒  -  50T新星诺卡菌PCR检测试剂盒规格

新星诺卡菌PCR检测试剂盒规格

产品简介

新星诺卡菌PCR检测试剂盒规格
上海联祖生物相关产品:
BACE1检测试剂盒需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化

更新时间:2021-03-13
访问次数:411
详细介绍在线留言

注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 新星诺卡菌PCR检测试剂盒规格

 英文名称

 Nocardia novaPCR

 货号

 LZP7068

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
PCPG中性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)酸锌 Anhydrous

DL-2-(2-Chlorophenyl)glycine中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)3.5酸锌 粒度 1~2μm

L-(+)-2-Chlorophenylglycine胶原酶(含10mL酶解缓冲液)3.5酸锌 粒度 2~5μm

CBZ-CL胶原酶(含100mL酶解缓冲液)3.5酸锌 粒度 6~10μm,防腐级

N-BZ-Val-Gly-Arg PNA•HC1弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)氟苯 99%

D-Val-Leu-Lys PNA•2HC1弹性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)氟化苯标准溶液 质分析标准溶液,1mg/ml 溶液

Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt透明质酸酶(含10mL酶解缓冲液)氟苯 Standard for GC ,≥99.6% (GC)

sodium Sarcosine透明质酸酶(含100mL酶解缓冲液)氟苯 CP

L-Aspartic acid calcium salt木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)氟苯 分析标准品

L-Glutamic acid 5-methyl ester木瓜蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)己酸丁酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)

N-Benzylglycine ethyl ester胰凝乳蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)己酸丁酯 ≥98%

L-tert-Leucine胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)丁位十二内酯 98%

L-tert-Leucine hydrochloride(R)-(-)-3-甲基-2-丁胺 98%, ee 97%丁酸乙酯 99%

L-Homoserine(S)-(+)-3-甲基-2-丁胺 98+%, ee 99%异戊 98%

D-allo-Isoleucine2-氨基苯甲 99%异戊 Standard for GC,>99%(GC)

AspartameDL-3-氨基丁酸 97%异戊 ≥97%,Kosher

奥沙利铂(标准品)COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2)  前列腺素氧化环化酶2(抗原)Sprouty1  软脂酰化磷蛋白Sprouty1抗体

硝酸奥昔康唑c-phycocyanin(C-PC)  C-藻蓝素(藻蓝蛋白)Sprouty 2  快速发育生长因子同源蛋白2抗体

盐酸土霉素CTGF (connective tissue growth factor)  结缔组织生长因子(多肽抗原)SPP24/SPP2  分泌性磷蛋白24抗体

盐酸土霉素(标准品)Cyclin E  周期素E/原癌基因抗原SPP/Signal Peptide Peptidase  信号肽肽酶SPP抗体

缩宫素,醋酸催产素Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A)  DNA甲基转移酶-3α(抗原)SPON2/M spondin/Mindin  细胞外基质底物反应蛋白2抗体

紫杉Cyclin C  周期素 C(抗原)SPON1/F spondin  细胞外基质底物反应蛋白1抗体

紫杉(标准品)CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP)  降钙素基因相关肽SPO11  减数分裂重组蛋白SPO11抗体

盐酸帕洛诺司琼CULLIN (Cdc53/CUL)  SPNS1  SPNS1抗体

硫酸巴龙霉素CYP450(Cytochrome P450 mooxygenase)  细胞色素P450单氧化酶(多肽抗原)SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2  肝细胞生长因子激活抑制蛋白2抗体

硫酸巴龙霉素(标准品)CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor)  脱羧酶蛋白体36 cxorf36抗原SPINK1/SPINK3  肿瘤相关胰蛋白酶抑制剂1抗体
新星诺卡菌PCR检测试剂盒规格人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

人发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

人法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人反*状腺原氨酸(rT3)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500克

人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人泛素蛋白D(UBD)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:1个

人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT10克

人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 

在线留言

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

TEL:021-61210612

扫码加微信