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黏孢子虫属通用PCR检测试剂盒规格

产品简介

黏孢子虫属通用PCR检测试剂盒规格
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更新时间:2021-03-13
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 黏孢子虫属通用PCR检测试剂盒规格

 英文名称

 Myxosporidia spp.PCR

 货号

 LZP7044

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
L-Ornithine HCL人上皮细胞*培养基大黄酚 分析标准品,≥98%

D-Ornithine HCL人成纤维细胞*培养基双醋瑞因 ≥95%(HPLC)

DL-Ornithine HCL人前列腺上皮细胞*培养基黄豆苷原 98%

L-Ornithine Ethylester Dihydrochloride人胰岛β细胞*培养基大黄素 分析标准品,≥96.0% (HPLC)

L-Aspartic acid人前列腺平滑肌细胞*培养基漆黄素 98%

L-Aspartic acid sodium sal人前列腺成纤维细胞*培养基甲溶液 ACS,37 wt. % in H2O, 含10-15% 甲稳定剂

Potassium L-Aspartate人甲状腺滤泡上皮细胞*培养基京尼平甙  分析标准品,≥98%

L-Aspartic acid Mg salt人胰腺星状细胞*培养基乙二溶液  40 wt. % in H2O (8.8 M)

D-Aspartic acid人胰腺上皮细胞*培养基甘草酸  93%

DL-Aspartic acid人淋巴内皮细胞*培养基加兰他敏 98%

L-Asparagine人淋巴成纤维细胞*培养基二氢黄酮甙 97%

L-Asparagine Mohydrate人淋巴血管内皮细胞*培养基和厚朴酚 分析标准品

DL- Asparaning H2O人脐带单核细胞*培养基和厚朴酚 ≥98% (HPLC)

L-Cysteine人外周血白细胞*培养基酚 97%

DL-Cysteine人呼吸道上皮细胞*培养基番茄红素 分析标准品,≥95%

L-Cysteine.HCI.H2O人上皮细胞*培养基柚皮苷 95%

盐酸平阳霉素p70 S6 Kinase/P70 Beta1  p70S6Kb抗原Thrombospondin 2  血小板反应蛋白2/凝血酶敏感蛋白2抗体

硫酸博莱霉素/博来霉素/争光霉素PALB2(partner and locaizer of BRCA2)  乳腺癌易感基因相关蛋白2Thrombomodulin/CD141  血栓调节蛋白抗体

替佐米/保特佐米PAFR/PTAFR  血小板活化因子受体抗原thrombin II  凝血酶Ⅱ(凝血因子II)抗体

替佐米(标准品)Phospho-PAK4 (Ser99) peptide  磷酸化p21激活激酶4多肽抗原Thrap3/TRAP150  甲状腺激素受体相关蛋白3抗体

博舒替尼PAK7/PAK5/MBT  激活激酶PAK7/PAK5抗原THRA1+2  甲状腺激素受体α1+α2抗体

布地奈德PAR-1 (Protease-activated receptors-1)  蛋白酶激活受体-1抗原THRA1  甲状腺激素受体α1抗体

布地奈德(标准品)PAR-2 (Protease-activated receptors-2)  蛋白酶激活受体-2抗原THOC2  转录因子THOC2抗体

亚叶酸钙PAR4 (protease-activated receptor 4)  蛋白酶活化受体4/前列腺细胞凋亡反应蛋白4抗原Thioster-containing protein 1  按蚊硫酯包含蛋白-1抗体

亚叶酸钙(标准品)PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus  多腺苷二磷酸多聚酶抗原(N端)Thioredoxin 2  线粒体硫氧还蛋白2抗体

喜树碱PAX8(Paired box gene 8)  配对盒基因8抗原Thioredoxin  硫氧还蛋白抗体
黏孢子虫属通用PCR检测试剂盒规格人白细胞调节素(LR)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5克

人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:500克

人百日咳毒素(PT)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:25000u

人瘢痕性天疱疮抗体(CP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:20个/包

人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人伴侣蛋白10(CPN10)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

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