蟾分枝杆菌PCR检测试剂盒规格上海联祖生物相关产品:L-LDH检测试剂盒自发现抗体后,用血清学方法在体外实验,证明了天然抗原与其相应抗体发生特异性结合
产品分类
PRODUCT CLASSIFICATION相关文章
RELATED ARTICLES注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 蟾分枝杆菌PCR检测试剂盒规格 |
英文名称 | Mycobacterium xenopiPCR |
货号 | LZP7020 |
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
小鼠表皮生长因子受体(EGFR)elisa试剂盒Anti-KRCC1研究领域 肿瘤 免疫学 神经生物学 细胞粘附分子 细胞骨架
犬S100B蛋白(S100B)elisa试剂盒Anti-Keratocan研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 免疫学 信号转导 生长因子和激素 血管内皮细胞 新陈代谢
小鼠椎间盘髓核细胞价格Anti-KIF3A产品类型 一抗
DMEM高糖 (不含L-谷氨酰胺,含双抗)价格Anti-KLC1/KNS2研究领域 肿瘤 免疫学 神经生物学 信号转导 激酶和磷酸酶
优级胎牛血清(100ml)报价Anti-KIZUNA/C20orf19研究领域 细胞生物
N-羟基琥珀酰亚胺实验步骤Anti-KRIT1研究领域 肿瘤 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 细胞粘附分子
普鲁士蓝实验步骤Anti-KCNE1研究领域 心血管 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
2-硝基乙酰苯胺实验步骤Anti-KCNE1L研究领域 心血管 神经生物学 信号转导 细胞膜受体 细胞自噬
MEM非必需氨基酸溶液(100×)报价Anti-KCNE2研究领域 细胞生物 发育生物学 神经生物学 信号转导 干细胞 通道蛋白 细胞粘附分子
大鼠 Klotho elisa试剂盒Anti-KCNJ5研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 神经生物学 信号转导 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
鲫鱼卵黄蛋白原(VTG)elisa试剂盒Anti-KCNG2研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶
小鼠雪旺氏细胞*培养基说明书Anti-KLH研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 神经生物学 生长因子和激素 糖尿病 内分泌病
胰岛素-转铁蛋白-硒-G添加剂(100×)报价Anti-KSR1研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学
甘氨酰-脯氨酰-对硝基本胺对甲苯磺酸盐保存Anti-KMT6/EZH2研究领域 细胞生物 神经生物学 生长因子和激素 内分泌病
耐尔蓝A使用说明书Anti-EKLF/KLF1, 2, 4研究领域 细胞生物 神经生物学 Alzheimer's
白术内酯Ⅲ;苍术内酯IIIHaase(hyaluronidase) 透明质酸酶/玻璃酸酶抗原TSPAN12/NET-2 四分子交联体12抗体(四旋蛋白)
蟾毒灵;蟾酥灵HA tag HA tag标签多肽TSPAN10/Oculospanin 四分子交联体10抗体(四旋蛋白)
根皮素HA tag(map) HA tag标签(分支多肽)TSPAN1 四分子交联体1抗体(四旋蛋白)
胆红素HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝细胞生长因子激活物抑制因子抗原TSP50 肿瘤/抗原20抗体
大叶茜草素HBA1(hemoglobin alpha 1) 人类血红蛋白α1抗原TSP-1/THBS1 血小板反应蛋白抗体
断血流皂苷AVWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原TSLP (human) 胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体(人)
羟基红花黄色素AURGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原TSLP 胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体
香紫苏URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原TSHZ3/ZNF537 锌指蛋白537抗体
槐角碱Beta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta) 人beta 亚基人绒毛膜促性腺激素抗原TSHR (NT) 促甲状腺素受体抗体(N端)
葫芦巴碱盐酸盐;盐酸葫芦巴碱Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亚基人绒毛膜促性腺激素多肽抗原TSHR (CT) 促甲状腺素受体抗体(C端)
蟾分枝杆菌PCR检测试剂盒规格人chemerinELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:RT5克
人c-junELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:1米
人c-myc癌基因产物(c-myc)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
人c-sisELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:500毫升
人CXC趋化因子受体1(CXCR1)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
人CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:50克
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。