产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > PCR试剂盒 > PCR检测试剂盒 > 50T蜂房蜜蜂球菌PCR检测试剂盒说明书
蜂房蜜蜂球菌PCR检测试剂盒说明书

蜂房蜜蜂球菌PCR检测试剂盒说明书

产品简介:蜂房蜜蜂球菌PCR检测试剂盒说明书
上海联祖生物相关产品:
E3/UBPL检测试剂盒建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本)

产品型号:50T

浏览次数:33

更新时间:2021-03-14

产品厂地:上海市

详情介绍
品牌其他品牌

注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 蜂房蜜蜂球菌PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Melissococcus plutoniusPCR

 货号

 LZP6963

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
15mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个说明书Anti-EPOR 研究领域  细胞生物 免疫学 神经生物学

MnCl2溶液,25mM,PCR 级5mL品牌Anti-EphA4 R/Eph receptor A4 研究领域  细胞生物 发育生物学 神经生物学

石蜡油,PCR 级10mL多少钱Anti-EIF2AK2/PKR 研究领域  细胞生物 转录调节因子 转运蛋白

dTTP 溶液,100mM0.5mL哪里有卖Anti-phospho-eIF4E(Ser209) 研究领域  细胞生物 免疫学 发育生物学 表观遗传学

G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD说明书Anti-EPHB4 研究领域  心血管 免疫学

单细胞悬浮液1mL说明书Anti-ERK1/2(p44/42 MAPK) 研究领域  心血管 信号转导

真菌种属鉴定 PCR Mix 5100 次说明书Anti-Enkephalin/P-ENK 研究领域  肿瘤 心血管 信号转导

φX174RF Ⅱ DNA30μg说明书Anti-ERK4 研究领域  心血管 免疫学

菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书Anti-ET-3/Endothelin 3 研究领域  心血管 信号转导 生长因子和激素 激酶和磷酸酶 泛素

素钠溶液 ,50mg/mL1mL多少钱Anti-ETS2 研究领域  肿瘤 心血管 信号转导

恶性疟PCR检测试剂盒保存Anti-ENaCg/γENaC 研究领域  细胞生物 神经生物学 信号转导

玉米MON810/MSPCR检测试剂盒说明书Anti-ERAS/HRAS2 研究领域  细胞生物 免疫学

转基因植物PAT基因PCR检测试剂盒说明书Anti-ETV7 研究领域  细胞生物 免疫学

人活化蛋白CElisa Kit说明书Anti-EEF2 研究领域  细胞生物 免疫学 细胞凋亡 细胞周期蛋白

小鼠乙酰胆碱转移酶Elisa Kit说明书Anti-EEF2k 研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 细胞周期蛋白

银锻苷Immuglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1  免疫球蛋白结合蛋白-1 雌激素受体IgG

3-乙酰基乳香酸CD133  造血干细胞抗原CD133 雌激素受体αIgG

3-乙酰基-11-酮CD133  造血干细胞抗原(多肽抗原) 抗人磷酸化雌激素受体αIgG

芫花素H5N1-H5  禽流感H5亚型全病毒 雌激素受体α/βIgG

野鹫尾苷Newcastle disease virus  鸡新城疫疫苗(鸡瘟4型混合病毒) 细胞核受体Rev-ErbαIgG

异甜菊SDF-1/CXCL12  基质细胞衍生因子1 磷酸化细胞核受体Rev-ErbαIgG

标准品Bacillus anthraci  炭疽杆菌菌体蛋白抗体

原阿片碱ADCY1 peptide  腺苷酸环化酶1多肽抗原 雌激素受体βIgG

异莲心碱c-erbB-2蛋白  c-erbB-2蛋白(抗原) 雌激素受体β IgG

α-亚油酸ChAT(Choline Acetyltransferase)  胆碱乙酰转移酶(抗原) 兔抗人、大、小鼠磷酸化雌激素受体αIgG
蜂房蜜蜂球菌PCR检测试剂盒说明书大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:RT,避光5克

大鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:100毫升

大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:25克

大鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:RT5克

大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:100毫克

大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:1克

大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:25克

大鼠固(ALD)ELISA试剂盒  特价促销shēng huà shì jì  容量:2~8℃25毫升
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

 



留言询价

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

上海联祖生物科技有限公司 公司地址:上海松江区莘砖公路518号5号楼601室   技术支持:环保在线
  • 电话:021-61210612
  • QQ:3191886983
  • 手机:13482402338 微信同号
  • 邮箱:3191886983@sdkjfhkjsdhfqq.com

扫一扫 更多精彩

微信二维码

联系我们

contact us

扫一扫,关注我们

返回顶部