阔盘吸虫通用PCR检测试剂盒厂家上海联祖生物相关产品:f-Hb检测试剂盒 川芎嗪;Ligustrazine H鹰嘴豆芽素A;Biochanin A
产品分类
PRODUCT CLASSIFICATION相关文章
RELATED ARTICLES
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 阔盘吸虫通用PCR检测试剂盒厂家 |
英文名称 | Eurytrema spp.PCR |
货号 | LZP6738 |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
表儿茶素价格Anti-GOSR2 Antibody研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 通道蛋白
5-肌苷二磷酸二钠盐保存Anti-GP1BA Antibody研究领域 细胞生物 生长因子和激素 细胞周期蛋白 结合蛋白
去氧胆酸实验步骤Anti-GP5 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶
棕榈酸使用说明书Anti-GPAT3 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 神经生物学 信号转导 细胞周期蛋白
磷脂酰乙醇胺使用说明书Anti-GPAT3 Antibody研究领域 细胞生物 细胞周期蛋白 细菌及 细胞分化 细胞骨架
粪便 DNAout100 次品牌Anti-GPC3 Antibody研究领域 神经生物学 细胞类型标志物 细胞膜蛋白
柱式植物 DNAout50 次品牌Anti-GPBAR1 Antibody研究领域 肿瘤 心血管 神经生物学 信号转导 细胞类型标志物 b-淋巴细胞
一管式植物 DNAout500 次说明书Anti-GPC1 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学
TAE 电泳液 ,50×250mL品牌Anti-GPC5 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学
DNA PAGE 胶回收试剂盒30 次多少钱Anti-GPR1 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞类型标志物
尼龙膜,13×20cm1张说明书Anti-GPR107 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学
杂交管 (35×100mm)1个哪里有卖Anti-GPR101 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学 信号转导 通道蛋白
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次哪里有卖Anti-GPR119 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学
免 DNA 提取 PCR 试剂盒100 次哪里有卖Anti-GPR108 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学 细胞类型标志物
转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次多少钱Anti-GPR12 Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学
2,4,6-三
1-三苯甲基咪唑-4-甲醛
2--3-苄溴
N-甲基-3-硝基苄胺
4-Cyaphenylboronic acid 4-基苯硼酸 126747-14-6
Ammonium cobalt(II) sulfate hexahydrate 钴铵 13586-38-4
Ammonium thiocyanate 硫氢酸铵 1762-95-4
AMMONIUM PHOSPHOTUNGSTATE TRIHYDRATE 磷钨酸铵 12704-02-8
大鼠脂质运载蛋白1(LCN1)ELISA试剂盒 ,英文名: LCN1 ELISA Kit
Mouse soluble myosin heavy chain 2 (sMHC-2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒
MouseFractalkine,FKELISAKit 小鼠趋化因子(FK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanHomocysteine(Hcy)ELISAKit人血浆同型半胱氨酸规格:48T/96T
维生素B2比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitKAF大鼠角化细胞内分泌因子规格:48T/96T
阔盘吸虫通用PCR检测试剂盒厂家Acetaldehyde ammonia trimer,≥96.0%通用试剂 25G
p-phthalaldehyde,99%通用试剂 10G
4-Ami-3-hydrazi-5-mercapto-1,2,4-t...通用试剂 5G
Caproaldehyde,98%通用试剂 100ML
(E)-2-Octenal,≥94%通用试剂 5ML
Acetal,≥98%通用试剂 25ML
Heptaldehyde,≥92%通用试剂 100ML
Polyvinyl butyral通用试剂 100G
4-Pyridinecarboxaldehyde,97%通用试剂 25G
2-Pyridinecarboxaldehyde,99%通用试剂 25G
p-Fluoro benzaldehyde,98%通用试剂 25G
p-Tolualdehyde,≥97%通用试剂 25G
p-Methyl benzaldehyde,≥97%通用试剂 25G
4-Hydroxy benzaldehyde,98%通用试剂 50G
Benzo[a]pyrene,≥98% (HPLC)通用试剂 100MG