产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > PCR试剂盒 > PCR检测试剂盒 > 50T肠杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书
肠杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书

肠杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书

产品简介:肠杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书
上海联祖生物相关产品:
HB-β检测试剂盒
阿马碱Raubasine483-04-5
补骨脂甲素Coryfolin19879-32-4

产品型号:50T

浏览次数:33

更新时间:2021-03-14

产品厂地:上海市

详情介绍
品牌其他品牌


注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 肠杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Enterobacter spp.PCR

 货号

 LZP6695

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
BOC-L-丙氨醇价格Anti-CX3CR1 Antibody研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 细胞类型标志物 细胞骨架

L-甲基多巴保存Anti-CXCL3 Antibody研究领域  心血管 细胞生物 免疫学 神经生物学 信号转导 细胞凋亡

CBZ-L-苯丙氨酸价格Anti-CXCL12 Antibody研究领域  肿瘤 心血管 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 生长因子和激素

FMOC-L-亮氨酸实验步骤Anti-CXCL5 Antibody研究领域  心血管 免疫学 神经生物学 信号转导 生长因子和激素 通道蛋白 细胞膜受体

芴甲氧羰基-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸保存Anti-CYB561D1 Antibody产品类型  一抗  药物与化合物抗体

DL-高半胱氨酸实验步骤Anti-CXCL8 Antibody产品类型  一抗

湿润剂P-40使用说明书Anti-CYB5R1 Antibody研究领域  细胞生物 免疫学 发育生物学 神经生物学 生长因子和激素

赖氨酸琼脂糖凝胶4B保存Anti-CYC1 Antibody研究领域  心血管 免疫学

再生纤维素透析袋(含溶液)价格Anti-CYB5A Antibody研究领域  细胞生物 信号转导 细胞凋亡 肿瘤细胞生物标志物 新陈代谢

微孔滤膜(混纤)实验步骤Anti-Cyclin C Antibody研究领域  肿瘤 免疫学 信号转导

5.0ml冻存管使用说明书Anti-CYFIP2 Antibody研究领域  肿瘤 细胞生物 免疫学 生长因子和激素 转录调节因子 细胞表面分子

乙酰辅酶A实验步骤Anti-CYP20A1 Antibody研究领域  心血管 细胞生物 免疫学 干细胞 细胞表面分子 淋巴细胞 b-淋巴细胞

核糖核酸酶抑制剂价格Anti-Cyclin C Antibody研究领域  肿瘤 细胞生物

还原辅酶Ⅰ二钠盐使用说明书Anti-CYP21 Antibody研究领域  肿瘤 细胞生物 信号转导 干细胞 生长因子和激素 转录调节因子 激酶和磷酸酶 表观遗传学

磷酸二酯酶I保存Anti-CYP26A1 Antibody研究领域  肿瘤 信号转导 细胞类型标志物 细胞骨架 肿瘤细胞生物标志物

1-N-BOC-3-苯胺  磷酸肌酸  2--5-甲氧基苯甲

2-溴-1-(2-基)-1-乙   5-降冰片烯-2-  硫代乙酸甲酯

2-(2-二乙基乙氧基)乙醇  聚苯  1,2-丁二硫醇

3,4-二苯异酸酯  3-甲氧基  2,3-丁二硫醇

Lawesson's Reagent  劳森试剂  19172-47-5

Lomefloxacin hydrochloride  盐酸洛美沙星  98079-52-8

4-Nitro-3-picoline N-oxide  3-甲基-4-硝基-N-氧化物  1074-98-2

Boron trifluoride-acetic acid complex  乙酸  373-61-5

大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人血管紧张素Ⅱ(2-7)免疫试剂盒 Human angiotensin II(2-7)ELISA Kit

人抗Smith抗体(Sm)ELISA试剂盒 ,英文名: Sm ELISA Kit

RatLaminin,LNELISA试剂盒大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒规格:96T/48T

Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISA试剂盒人糖化蛋白(GSP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit人肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
肠杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书Trimethylsilyl isocyanate,85%通用试剂 10G

Allyl acetate,99.0%通用试剂 25ML

Allyl acetoacetate,98%通用试剂 25G

Trimethyl phosphoacetate,98%通用试剂 25G

Allyl heptaate,≥97%通用试剂 25G

Allyl hexaate,≥98%通用试剂 100G

Trimethyl orthobutyrate,≥97.0%通用试剂 5ML

Trimethyl orthovalerate,≥97.0%通用试剂 5ML

Allyltrifluoroacetate,98%通用试剂 10G

N-(4-Amibenzoyl)-L-glutamic acid die...通用试剂 10G

N-(4-Amibenzoyl)-L-glutamic acid die...通用试剂 10G

3-(Trifluoromethyl)phenyl isocyanate,97%通用试剂 1G

4-(Trifluoromethoxy)phenyl isocyanate,...通用试剂 1G

Triethyl 2-fluoro-2-phosphoacetate,96%通用试剂 1G

1,2,4,5-Tetrachlorobenzene,98%表面活性剂 25G



留言询价

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

上海联祖生物科技有限公司 公司地址:上海松江区莘砖公路518号5号楼601室   技术支持:环保在线
  • 电话:021-61210612
  • QQ:3191886983
  • 手机:13482402338 微信同号
  • 邮箱:3191886983@sdkjfhkjsdhfqq.com

扫一扫 更多精彩

微信二维码

联系我们

contact us

扫一扫,关注我们

返回顶部