温和气单胞菌PCR检测试剂盒规格

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
人基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）elisa试剂盒Anti-Arsb Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 转录调节因子

人活化凝血因子Ⅻ（FⅫa）elisa试剂盒Anti-ASIC2 Antibody研究领域 细胞生物 发育生物学 干细胞 结合蛋白 表观遗传学

人黑色素瘤标记物（MART/Melan-A）elisa试剂盒Anti-ASIC2 Antibody研究领域 肿瘤 发育生物学 干细胞 细胞凋亡 细胞粘附分子

人核基质蛋白22（NMP-22）elisa试剂盒Anti-ASIC1 Antibody研究领域 细胞生物 发育生物学 信号转导 干细胞 表观遗传学

人含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1（Tie-1）elisa试剂盒Anti-ASAH1 Antibody研究领域 细胞生物 发育生物学 干细胞 细胞凋亡 生长因子和激素 新陈代谢

人骨成型蛋白受体Ⅱ（BMPR-Ⅱ）elisa试剂盒Anti-ASIC2 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 干细胞

人孤腓肽（OFQ/N）elisa试剂盒Anti-ASIC3 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 神经生物学 信号转导 干细胞 跨膜蛋白

人肝素结合EGF样生长因子（HBEGF）elisa试剂盒Anti-ASL Antibody研究领域 细胞生物 神经生物学 信号转导 干细胞

人甘露糖受体（MR）elisa试剂盒Anti-ASS1 Antibody研究领域 细胞生物 染色质和核信号 神经生物学 信号转导 干细胞 表观遗传学

人甘氨酸elisa试剂盒Anti-ASPH Antibody研究领域 细胞生物 信号转导 干细胞 激酶和磷酸酶

人干扰素诱导T细胞趋化因子（ITAC/CXCL11）elisa试剂盒Anti-ASXL1 Antibody研究领域 干细胞 生长因子和激素 激酶和磷酸酶 细胞表面分子

人非小细胞肺癌相关抗原211（CA211）elisa试剂盒Anti-ASXL1 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶

人儿茶酚胺（CA）elisa试剂盒Anti-ATF1 Antibody研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 细胞粘附分子

人多效生长因子（PTN）elisa试剂盒Anti-ATF2 Antibody研究领域 细胞生物 细胞周期蛋白 转录调节因子 线粒体

人对称二甲基精氨酸（SMDA）elisa试剂盒Anti-ATF1 Antibody(原货号PB0098)研究领域 免疫学 转运蛋白 交换蛋白

无机盐琼脂培养基250g纺织品防霉性能测试

MUGal(4-甲基伞形酮-β-半乳糖苷)肉汤基础 100(g) incubation media MUGal(4-甲基伞形酮-β-半乳糖苷)肉汤基础 100(g)

大肠杆菌&大肠菌群显色培养基 E.Coli&Coliform Chromogenic Medium 1升 同时检测大肠菌群和大肠杆菌，培养24小时，大肠杆菌显紫色，大肠菌群显红色

改良MC培养基250incubationmedia改良MC培养基250

氯营养琼脂 250g 霍乱弧菌传代培养或纯化培养

YM肉汤  YM Broth  250克  BR

土霉素葡萄糖酵母粉琼脂基础  OGY Agar  250克  霉菌、酵母菌分离培养和计数

华伦斯坦实验室营养琼脂  WL Nutrient Agar  250克  啤酒和发酵产品中酵母菌和细菌的计数

沙氏脑心浸液琼脂  Sabouraud BHI Agar  250克  真菌检测
温和气单胞菌PCR检测试剂盒规格HER2受体抗体4-Hydroxy-2,6,6-trimethyl-1-cyclohexenecarboxylic acid中文名：别名：分子式：C10H16O3

结合珠蛋白/触珠蛋白抗体Foliamenthoic acid中文名：别名：8-Hydroxy-2,6-dimethyl-2,6-octadieic acid分子式：C10H16O3

高迁移率族蛋白B4抗体Bombiprene中文名：别名：分子式：C43H70O

组蛋白去乙酰化酶2抗体环烯醚萜

乙肝病毒Large S蛋白抗体10-Hydroxyligstroside中文名：别名：分子式：C25H32O13
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。