小鼠ELISA试剂盒的竞争法实验步骤分析

　　小鼠ELISA试剂盒定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中相关物质含量。常用方法包括双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。今天我们来聊聊竞争法，竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应，抗HBe的检测一般采用此法。
 

　　小鼠ELISA试剂盒的竞争法实验步骤如下所述：
 

　　1.以稀释液将待检标本做适当稀释(预试中确定)加入包被有已知抗原的酶标板中(50ul/孔)，加封口胶带于37℃作用30min；
 

　　2.弃反应液，以冲洗液连续洗板5次并于吸水纸上拍干；
 

　　3.加入酶标抗体(浓度在预试中确定)。加封口胶带后于37℃作用30min；
 

　　4.重复第2步；
 

　　5.加底物(浓度在预试中确定)，小鼠ELISA试剂盒加封口胶带后于室温下避光作用5-60 min，其间不时观察，显色满意后加终止液50ul/孔；
 

　　6.在酶标仪中测定OD值，OPD用492nm测定，TMB用450nm测定。