小鼠ELISA试剂盒的测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。ELISA应用时各个操纵步骤的应留意,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,要严格遵照划定操纵,才能得出正确的结果。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可溅出,不可产气愤泡。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清,可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。
小鼠ELISA试剂盒中三个是必要的试剂为免疫吸附剂、结合物和酶的底物等:
免疫吸附剂已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2-8℃)干燥的条件下一般可保存6个月以上。有些不完整的试盒,仅供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行包被。以下简述固相载体和包被过程。
固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作ELISA中载体的材料很多,常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。
小鼠ELISA试剂盒对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置。