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elisa试剂盒的主要检测条件有哪些?

更新时间:2022-05-16点击次数:538
   elisa试剂盒常用的方法有双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。该试剂盒的专一性强,抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
  elisa试剂盒主要检测条件如下:
  1.elisa加样
  elisa一般有3次加样步聚,即加标本→加酶结合物→加底物。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、待其收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。
  一般说来,5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。可用作elisa测定的标本十分广泛,体液、分泌物和排泄物等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份,elisa试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。
  2.固相载体
  加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴,以发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。
  好的仪器和准确的操纵是保证elisa试剂盒检测结果正确可靠的必要条件。elisa顶用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。有些标本可直接进行测定,有些则需经预处理。
  3.标本因素
  血清标本可按常规方法采集,应留意避免溶血,红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的elisa测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久,其中的可发生聚合,在间接法elisa中可使本底加深。

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