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探讨大鼠ELISA试剂盒应用时的检测程序

发布时间: 2021-11-08  点击次数: 28次
   大鼠ELISA试剂盒用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。
  大鼠ELISA试剂盒试验时制备试剂与收集血样:
  1.收集标本
  血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作1:10稀释。
  2.标准品液配制
  使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成10ng/ml的溶液。设标准管8管,1管加标本稀释液900ul,2-8管加入标本稀释液500ul。在1管中加入10ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至2管。如此反复作对倍稀释,从第7管中吸出500ul弃去。第2管为空白对照。
  3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。
  4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)。
  相关检测程序:
  1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟;
  2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干;
  3.每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟;
  4.洗板:同前;
  5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟;
  6.洗板:同前;
  7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟;
  8.每孔加入100ul终止液混匀;
  9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

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