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脊髓灰质炎病毒1型PCR检测试剂盒实验原理

发布时间: 2021/4/30  点击次数: 16次      文件下载    

脊髓灰质炎病毒1型PCR检测试剂盒说明书

本产品是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
脊髓灰质炎病毒1型PCR检测试剂盒说明书技术特点:
1、准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
2、高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3、快速:整个检测流程只需3小时。
4、简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5、防污染
6、高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
组成及试剂配制:
1、 酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
脊髓灰质炎病毒1型PCR检测试剂盒说明书要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
准备物品:
清理液(A)                                   毫升
染色液(t B)                                   微升
稀释液(C)                                   毫升
溶解液(tD)                                   毫升
产品说明书                                   1份
脊髓灰质炎病毒1型PCR检测试剂盒说明书操作方法:
1产品名称直接测定
2测定准备
3背景对照测定
4样品活性测定
5计算样品活性
备注:
1.本产品为50次操作
2.操作时,须戴手套
3.操作时,避免污染母液
4.即刻进行荧光检测分析 
5.本产品染色剂不易洗掉,染色持久
6.本公司提供系列试剂产品
运输及保存:低温运输、-20℃保存,有效期一年。

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