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TECHNICAL ARTICLES
PCR是现代分子生物学和临床诊断中的核心技术之一，而探针法PCR因其高特异性与可定量能力，被广泛应用于病原体检测、基因突变分析及转基因鉴定等领域。在使用探针法PCR检测试剂盒时，选择合适的核酸模板是确保实验成功的关键前提。本文将对常见的模板类型及其适用注意事项进行科普说明。一、DNA模板DNA是常用的PCR模板类型，适用于绝大多数探针法试剂盒，尤其是针对细菌、病毒（如乙肝病毒HBV、人乳头瘤病毒HPV）、人类基因等目标的检测。模板可以来源于基因组DNA（gDNA）或质粒DNA...
鲍氏不动杆菌（Acinetobacterbaumannii）是一种重要的多重耐药革兰阴性条件致病菌，常引起医院获得性肺炎、血流感染及伤口感染，严重威胁重症患者生命安全。为实现快速、精准检测，基于荧光定量pcr（qpcr）技术的荧光pcr检测试剂盒已被广泛应用于临床微生物实验室。值得注意的是，尽管pcr本身不依赖传统培养，但在试剂盒开发、性能验证及阳性对照制备等环节，仍需依赖特定培养基对鲍氏不动杆菌进行扩增培养。本文将聚焦于该过程中所用培养基的关键组分及其典型含量，解析其在保障...
免疫组化阴性对照的选择其实有明确的黄金法则：优先选基因敲除样本，没有的话就用天然低表达组织。一、方案：基因敲除样本操作：用基因敲除（KO）或敲低（KD）的组织，比如CD4检测用CD4-KO小鼠优势：结果，能直接排除抗体交叉反应二、备选方案：天然低表达组织操作：查HumanProteinAtlas找目标蛋白低表达的组织示例：PD-L1检测用正常肺组织三、关键操作要点同步处理：和实验组用同一批固定液、同种修复方法验证：若阴性对照显色，可能是抗体交叉反应...
即用型PCR试剂盒（染料法）操作步骤1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。10×PCRbuffer5μldNTPmixl4μl引物1（10pM）2μl引物2（10PM）2μlTaq酶（2U/μl）1μlDNA模板（50ng-1μg/μl）1μl加ddH2O至50μl视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃40s→58℃30s→7...
人α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）elisa试剂盒洗涤方法：1.自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。2.手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品10...
KLH,小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到...
围脂滴蛋白1ELISA检测试剂盒操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔...
IL-2/P40elisa酶联免疫试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读...
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