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免疫组化阴性对照的选择其实有明确的黄金法则:优先选基因敲除样本,没有的话就用天然低表达组织。一、方案:基因敲除样本操作:用基因敲除(KO)或敲低(KD)的组织,比如CD4检测用CD4-KO小鼠优势:结果,能直接排除抗体交叉反应二、备选方案:天然低表达组织操作:查HumanProteinAtlas找目标蛋白低表达的组织示例:PD-L1检测用正常肺组织三、关键操作要点同步处理:和实验组用同一批固定液、同种修复方法验证:若阴性对照显色,可能是抗体交叉反应...
即用型PCR试剂盒(染料法)操作步骤1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。10×PCRbuffer5μldNTPmixl4μl引物1(10pM)2μl引物2(10PM)2μlTaq酶(2U/μl)1μlDNA模板(50ng-1μg/μl)1μl加ddH2O至50μl视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃40s→58℃30s→7...
人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)elisa试剂盒洗涤方法:1.自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。2.手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品10...
KLH,小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白ELISA试剂盒操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到...
围脂滴蛋白1ELISA检测试剂盒操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔...
IL-2/P40elisa酶联免疫试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读...
TGFβ2小鼠转化生长因子β2ELISA检测试剂盒注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必...
小鼠碳酸酐酶免费代测ELISA样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心...