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小鼠opiorphin elisa检测试剂盒操作步骤

更新时间:2021-09-27点击次数:619

小鼠opiorphin elisa检测试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY

小鼠胚胎成纤维细胞;MEF

小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞);YAC-1

野生型人c-kit受体细胞株;A7d

小鼠原B细胞株;BaF3

小鼠脑瘤细胞;BC3H1

小鼠成肌细胞;C2C12

小鼠肝癌细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]

小鼠肥大细胞瘤细胞;P815

小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albino

小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6

小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS

小鼠淋巴瘤细胞;EL4

小鼠前胃癌细胞;MFC

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7

小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-L1

小鼠乳腺癌细胞;CCC-Ca761-03

小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C 3T3

小鼠淋巴细胞白血病;L1210

小鼠肺腺癌细胞系;LA795

C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK-

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3

仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11

小鼠黑色素瘤细胞;B16

小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9

小鼠单核巨噬细胞;J774A.1

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1

绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞;MFC-GFP

小鼠肾足细胞;Mouse podocyte

小鼠淋巴瘤细胞;P388D1(IL-1)

小鼠子宫颈癌细胞;U14

绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞;U14-GFP

小鼠浆细胞瘤;MPC-11

小鼠胚胎成纤维细胞;PA317

转PYTL基因小鼠睾丸支持细胞;15P-1

BALB/C小鼠肝上皮细胞;BNL 1ME A.7R.1

小鼠结肠癌细胞;CT26.WT [CT26WT]


TEL:021-61210612

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