小鼠opiorphin elisa检测试剂盒操作步骤

小鼠opiorphin elisa检测试剂盒操作步骤：

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

小鼠骨髓瘤细胞；Fox-NY

小鼠胚胎成纤维细胞；MEF

小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)；YAC-1

野生型人c-kit受体细胞株；A7d

小鼠原B细胞株；BaF3

小鼠脑瘤细胞；BC3H1

小鼠成肌细胞；C2C12

小鼠肝癌细胞；Hepa 1-6 [Hepa1-6]

小鼠肥大细胞瘤细胞；P815

小鼠胚胎成纤维细胞；3T6-Swiss albino

小鼠胚胎成纤维细胞；C3H 10T1/2 2A6

小鼠树突状细胞肉瘤细胞；DCS

小鼠淋巴瘤细胞；EL4

小鼠前胃癌细胞；MFC

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞；RAW 264.7 [RAW264.7

小鼠胚胎成纤维细胞；3T3-L1

小鼠乳腺癌细胞；CCC-Ca761-03

小鼠胚胎成纤维细胞；BALB/C 3T3

小鼠淋巴细胞白血病；L1210

小鼠肺腺癌细胞系；LA795

C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）；LTK-

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞；SH2

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞；SH3

仓鼠/小鼠杂交瘤细胞；145-2C11

小鼠黑色素瘤细胞；B16

小鼠T淋巴细胞；Cl.Ly1+2-/9

小鼠单核巨噬细胞；J774A.1

小鼠肾集合管细胞(SV40转化)；M-1

绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞；MFC-GFP

小鼠肾足细胞；Mouse podocyte

小鼠淋巴瘤细胞；P388D1(IL-1)

小鼠子宫颈癌细胞；U14

绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞；U14-GFP

小鼠浆细胞瘤；MPC-11

小鼠胚胎成纤维细胞；PA317

转PYTL基因小鼠睾丸支持细胞；15P-1

BALB/C小鼠肝上皮细胞；BNL 1ME A.7R.1

小鼠结肠癌细胞；CT26.WT [CT26WT]