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抗凝裂解大牛血保存的注意事项

发布时间: 2021-07-06  点击次数: 212次

抗凝裂解大牛血保存的注意事项以下几点:

(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.
(2)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.
(3)热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.
(4)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.
(5)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.

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结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)
改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(MLST)
万古霉素(改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤冻干配套试剂)
脑—心浸萃液态培养基
TSA胰蛋白胨大豆琼脂培养基(大豆消化酪素琼脂培养基)
缓冲蛋白胨水(缓冲胨水增菌液) (BPW)
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)
改良月桂基硫酸盐胰蛋白月示肉汤(MLST)
肠道菌增菌肉汤(E E)
阪崎肠杆菌显色培养基
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)
改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(MLST)
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