如何选择适合的免疫组化阴性对照

免疫组化阴性对照的选择其实有明确的黄金法则：‌优先选基因敲除样本，没有的话就用天然低表达组织‌。

一、方案：基因敲除样本

‌操作‌：用基因敲除（KO）或敲低（KD）的组织，比如CD4检测用CD4-KO小鼠

‌优势‌：结果，能直接排除抗体交叉反应

二、备选方案：天然低表达组织

‌操作‌：查Human Protein Atlas找目标蛋白低表达的组织

‌示例‌：PD-L1检测用正常肺组织

三、关键操作要点

‌同步处理‌：和实验组用同一批固定液、同种修复方法

‌验证‌：若阴性对照显色，可能是抗体交叉反应或封闭不充分

‌记录‌：标注组织来源和处理条件，方便追溯

四、常见问题

‌假阳性‌：阴性对照显色→排查抗体特异性或封闭步骤

‌假阴性‌：阴性对照未显色→检查抗体效价或显色试剂

‌记住‌：阴性对照是免疫组化的"质检员"，选对样本、同步处理、定期验证是关键。